转基因技术的原理是什么?
转基因技术指人为将一种生物的一个或几个已知功能基因转移到另一种生物体内安家落户，使该生物获得新功能的技术。世界上第一个转基因大肠杆菌于1982年重组成功，用于生产胰岛素，同年诞生了全球首例转基因烟草，从1996年起转基因作物开始大规模商业化种植。随着科技的不断进步，育种技术经过最初的自然驯化、人工选择、人工诱变、杂交育种，逐步发展到现在的分子标记辅助育种、分子设计育种和转基因育种技术。转基因育种技术与传统育种技术一脉相承。传统育种是依靠品种间的杂交实现了基因重组，而转基因育种是通过基因定向转移实现了基因重组，两者本质上都是通过改变基因及其组成以获得优良性状的。转基因育种的特殊之处在于可以实现跨物种的基因发掘，拓宽遗传资源的利用范围，实现已知功能基因的定向高效转移，使生物获得人类需要的特定性状，为高产、高抗农业生物新品种培育提供了新的技术途径。例如，抗除草剂作物就是将抗除草剂草甘膦的基因转入农作物，从而在使用除草剂（草甘膦）除草时就能够做到只除草而不危及作物。扩展资料：转基因技术目前主要应用领域：转基因技术目前广泛应用于医药、工业、农业、环保、能源等领域。转基因技术首先在医药领域得到广泛应用，1982年美国食品药品管理局（FDA）批准利用转基因微生物生产的人胰岛素商业化生产，这是世界首例商业化应用的转基因产品。此后，利用转基因技术生产的药物层出不穷，如重组疫苗、抑生长素、干扰素、人生长激素等。转基因技术广泛应用的第二个领域是农业，包括转基因动物、植物及微生物的培育，其中转基因作物发展最快，具有抗虫、抗病、耐除草剂等性状的转基因作物大面积推广，品质改良、养分高效利用、抗旱耐盐碱转基因作物纷纷面世。转基因技术在工业中的应用也有长久历史，如利用转基因工程菌生产食品用酶制剂、添加剂和洗涤酶制剂等。此外，转基因技术还广泛应用于环境保护和能源领域。参考资料：人民网-基因技术究竟是个啥
转基因技术目前主要应用在哪些方面？
转基因技术广泛应用于农药、工业、农业、环保、能源、新材料等领域。例如重组疫苗、胰岛素、人生长激素的生产，纤维素的开发和利用，农业新品种的培育，环境保护和能源的生产等。养殖业：实际运用还不多，最典型的例子是美国宣布转基因三文鱼批准面市，其它还有一些诸如三倍体鲫鱼等水产。食品加工业：酸奶、啤酒、酱油等经过发酵的食品和调味品大都是通过转基因酵母菌制造。另外转基因作物的加工（例如用转基因玉米制造的高果糖浆等）通常不算在转基因技术的直接利用之中。技术原理：转基因技术是利用现代生物技术，将人们期望的目标基因，经过人工分离、重组后，导入并整合到生物体的基因组中，从而改善生物原有的性状或赋予其新的优良性状。除了转入新的外源基因外，还可以通过转基因技术对生物体基因的加工、敲除、屏蔽等方法改变生物体的遗传特性，获得人们希望得到的性状。这一技术的主要过程包括外源基因的克隆、表达载体构建、遗传转化体系的建立、遗传转化体的筛选、遗传稳定性分析和回交转育等。以上内容参考：百度百科-转基因技术
植物表达载体构建的全过程?
1.2.5转化农杆菌的PCR鉴定采用文献［4］的方法分别提取农杆菌（EHA105,GV3101）中的mini?Ti质粒,用预先设计的引物进行PCR扩增鉴定,获得可用于遗传转化的农杆菌.
2结果
2.1PCR方法获取hIL?12基因片段以质粒pCA13?hIL?12为模板,运用PCR方法获得全长hIL?12基因（1613 bp,图2）.
2.2重组质粒pBI121?hIL?12的鉴定经限制性内切酶SmaI,SacI酶切后得到大小约1600 bp和12800 bp的大片段,表明hIL?12已经克隆到质粒pBI121中（图3）.质粒送上海生工生物工程公司进行全长测序鉴定,通过序列比对分析发现,目的基因与GenBank中已发表的基因序列完全一致,表明植物表达载体pBI121?hIL?12构建成功.
2.3转化农杆菌的PCR检测从三亲融合后的农杆菌中提取mini?Ti质粒,进行PCR扩增,扩增出大小约1600 bp的片段,与来自大肠杆菌DH5α中的重组质粒pBI121?hIL?12为模板的PCR产物一致,而对照空载根癌农杆菌单菌落为空白,表明获得了2种含hIL?12基因的植物表达载体的农杆菌（图5）.
3讨论
hIL?12是相对分子质量为75 ku的蛋白质,由不同基因编码的2个亚基P35与P40两条肽链通过二硫键结合在一起的异二聚体,研究表明,细胞必须同时表达这两个基因才能产生有活性的IL?12.我们选用的质粒pCA13?hIL?12中的hIL?12基因就是利用这两个亚基具有独立的基因序列特点,将hIL?12两个亚单位进行融合,中间插入一个Linker序列,以保证其基因产物具有正确的蛋白结构及等比例的表达.
实验中选用的载体pBI121是一个常用的植物表达载体,多克隆位点上游带有CaMV35S启动子,在植物组织中能启动外源基因的表达,下游带有GUS报告基因,由于酶切位点的要求,本实验的GUS已被切除,切除了GUS报告基因,给转化子的筛选带来了不便,但这一缺憾可以通过特异性引物进行PCR检测来弥补；在NOS启动子下游带有NPTII基因,可进行Kanamicin抗性筛选.
Mason等［5］提出了利用植物作生物反应器生产口服疫苗的设想.我们构建的植物表达载体pBI121?hIL?12,可以用于马铃薯、烟草、番茄等植物的转化,从而为用植物作为生物反应器生产药用蛋白提供实验基础.目前,将hIL?12基因转入马铃薯的工作正在进行中.我们成功构建了hIL?12基因的植物表达载体,为最终实现用植物生产hIL?12奠定了基础.
如何设计构建一个载体，将目的基因在植物根系表达并向
①基因表达载体的构建是基因工程的核心内容，一个表达载体的组成，除了目的基因外，还有启动子、终止子和标记基因等，①正确；②启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始，②正确；③由于受体细胞有植物、动物以及微生物之分，以及目的基因导入受体细胞的方法不同，因此基因表达载体的构建是不完全相同的，③错误；④终止子在基因的尾端，它控制着转录的结束，④正确．故选：B．
